線蟲分離器

線蟲分離器

一、產(chan) 品介紹

本款線蟲分離器由玻璃漏鬥、橡皮管、止水夾組成，適用於(yu) 各植保站、森防站、獸(shou) 醫站、衛生防疫站以及高等院校和科研院所與(yu) 線蟲研究有關(guan) 的科室。

二、產(chan) 品參數

1、玻璃漏鬥

直徑：12cm，高度：30cm

2、橡皮管

直徑：1cm，長度：40cm

3、止水夾

長5。5cm，寬6。5cm

三、使用方法

1、貝爾曼漏鬥法：

將玻璃漏鬥（直徑為(wei) 10–15 cm）置漏鬥架上,下麵接一段（10 cm左右）橡皮管,橡皮管上裝一個(ge) 止水夾。取濕重10g劈成“火柴杆"狀大小的分離材料,用兩(liang) 層紗布包好,放入漏鬥中,然後放入清水,清水以浸沒分離材料為(wei) 度。經過4–24小時,由於(yu) 趨水性和本身的重量,線蟲離開植物組織,並在水中遊動,最後沉降到漏鬥底部的橡皮管中。打開止水夾,取底部約5–15ml的水樣,其中含有樣本中大部分活動的線蟲。在解剖鏡下檢查,如果線蟲的數量少,可以離心（1500 r/min,2–3 min）沉降後再檢查。

2、常規鏡檢：

分別將各標號盛有線蟲分離液的培養(yang) 皿置於(yu) 解剖鏡下觀察,先確認有無線蟲。對有線蟲的樣品進行活體(ti) 鏡檢,觀察它的一般形態結構。然後選擇幾條成熟、特征易觀察的線蟲,用針或吸管移至載玻片上的水滴中。將此載玻片在酒精燈火焰上方往返幾次（5–6 s）或放置於(yu) 已盛滿高溫熱水、打開蓋子的保溫瓶口上,蒸30–60 s至蟲體(ti) 死亡,加蓋玻片後在顯微鏡下觀察。根據形態特征予以初步鑒別,以確定是否需作進一步的鑒定。

3、快速鏡檢：

（1）用顯微鏡直接觀察線蟲濃縮分離液。分離液經一定時間後,當漏鬥下端和乳膠管內(nei) 出現透明度降低甚至混濁現象、表明線蟲的遊離量較多時,即可用培養(yang) 皿接取混濁狀分離液3–5滴,直接置於(yu) 解剖鏡下觀察；如有線蟲,就將盛有分離液滴的培養(yang) 皿,放置於(yu) 已盛滿高溫熱水、打開蓋子的保溫瓶口上,進行30–60 s的熱殺處理,擦幹培養(yang) 皿底部凝結的小水珠,直接放置於(yu) 顯微鏡下（先用低倍物鏡,找到目標線蟲,再轉換到高倍物鏡）觀察形態特征予以鑒別。

（2）用顯微鏡直接觀察線蟲分離液。用培養(yang) 皿盛放貝爾曼漏鬥放出的線蟲懸液適量,直接移放在光學顯微鏡下觀察,用低倍鏡調整焦距,找到線蟲,一手移動培養(yang) 皿,不斷變換所觀察線蟲的位置,一手不斷調整焦距。在10倍的接物鏡下鬆材線蟲的基本形態鑒定特征如頭部、中食道球、陰門、交合刺、尾形等都可以清晰地觀察到。發現分離液中存有鬆材線蟲時,挑取線蟲並製成臨(lin) 時玻片標本進一步觀察。

四、形態鑒定：

依據雌雄成蟲的形態,主要是雌成蟲的形態進行鑒定。但分離到的線蟲沒有成蟲或極少時,需進行培養(yang) ,以獲得大量雌雄成蟲供鑒定。